熒光PCR檢測(cè)試劑盒是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù)的分子生物學(xué)工具,廣泛應(yīng)用于基因定量分析、病原體檢測(cè)等領(lǐng)域。以下是其核心作用及儲(chǔ)存條件的詳細(xì)說(shuō)明:
1. 高靈敏度的目標(biāo)核酸定量
原理:利用Taq DNA聚合酶在擴(kuò)增過(guò)程中釋放的熒光信號(hào)強(qiáng)度與模板DNA含量成正比的關(guān)系,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因片段的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)。可檢測(cè)低至單拷貝水平的核酸分子。
應(yīng)用場(chǎng)景:
病毒載量測(cè)定;
腫瘤標(biāo)志物微小殘留病灶監(jiān)測(cè);
轉(zhuǎn)基因成分篩查(GMO檢測(cè))。
2. 多重靶標(biāo)同步鑒別能力
通過(guò)設(shè)計(jì)不同熒光通道的探針或引物組合,可在同一反應(yīng)體系中區(qū)分多種目標(biāo)序列。例如:
呼吸道合胞病毒/腺病毒/流感病毒聯(lián)合檢測(cè);
SNP基因分型用于藥物代謝相關(guān)多態(tài)性分析。
3. 封閉體系降低污染風(fēng)險(xiǎn)
采用預(yù)混液形式提供所有必需組分,減少移液步驟帶來(lái)的交叉污染概率。配合帶濾芯的槍頭使用,可將氣溶膠污染率控制在0.1%以下。
4. 自動(dòng)化兼容與標(biāo)準(zhǔn)化輸出
適配主流qPCR儀器,內(nèi)置ROX校正染料自動(dòng)扣除背景干擾。配套軟件支持熔解曲線分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制等功能,確保結(jié)果可重復(fù)性CV值<5%。
二、熒光PCR檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存特殊注意事項(xiàng):
光敏感性防護(hù):熒光染料見光易淬滅,需使用不透明鋁箔袋包裝并儲(chǔ)存于暗處。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在弱紅光照明下進(jìn)行。
熱穩(wěn)定性限制:某些熱啟動(dòng)聚合酶制劑在室溫放置超過(guò)4小時(shí)后活性下降超20%,必須嚴(yán)格遵循“用多少取多少”原則。
磁珠法提取試劑兼容性:若配套核酸提取步驟,需驗(yàn)證磁珠與試劑盒緩沖液的離子強(qiáng)度匹配度,防止結(jié)合效率下降。
